GFP（綠色熒光蛋白）和YFP（黃色熒光蛋白）可不可以共用一款熒光蛋白激發(fā)光源，首先這得看GFP和YFP的***佳激發(fā)波長是否一樣，另外得看激光光源本身是不是具備多種波段。

GFP和YFP激發(fā)波長

綠色熒光蛋白 (GFP) 是一種 β-桶狀蛋白 ，由 238 個氨基酸組成，分子量約為 27 kDa。GFP 是從水晶水母 Aequorea victoria  分離而來。GFP 可通過能量轉(zhuǎn)移，將水母發(fā)光蛋白通過化學(xué)作用發(fā)出的藍(lán)色熒光轉(zhuǎn)變?yōu)榫G色熒光。GFP 的激發(fā)波長為 488 nm，并在約 507 nm 處有一個發(fā)射峰。同時，對 GFP 的高分辨率晶體結(jié)構(gòu)研究，使得科學(xué)家們能操縱其蛋白結(jié)構(gòu)，改造出在不同波長發(fā)射的顏色變體。

從下面GFP激發(fā)和發(fā)射波長圖可得知，GFP的激發(fā)波長為300-510nm，主峰在488nm

增強(qiáng)型黃色熒光蛋白（EYFP）是黃色熒光蛋白突變體，有四個氨基酸發(fā)生突變，使得EYFP的發(fā)射光變?yōu)辄S綠色，且熒光強(qiáng)度與EGFP熒光強(qiáng)度相似。mCitrine和mVenus在EYFP基礎(chǔ)上改進(jìn)的黃色熒光變體應(yīng)用較為廣泛。另外，還有一種經(jīng)合成的DNA重排獲得的能量轉(zhuǎn)移黃色熒光蛋白YPet，亮度在黃色熒光蛋白中是***強(qiáng)的，且光穩(wěn)定性較強(qiáng)。同時，YPet比mVenus或者其他熒光蛋白對于酸性環(huán)境的耐受能力更強(qiáng)。

從下面YFP激發(fā)和發(fā)射波長圖可得知：

YFP的激發(fā)波長為300-520nm，主峰在505nm

由上可知，GFP和YFP的激發(fā)波長有重疊，YFP在GFP激發(fā)主峰488nm也能吸收足夠的能量被激發(fā)，所以可以共用488nm激發(fā)波段的激發(fā)光源。但是從嚴(yán)格上來說，505nm才是YFP的激發(fā)主峰，激發(fā)效果比較好，所以一般不建議用488nm激發(fā)光源去激發(fā)YFP，如果YFP表達(dá)量不是很高的話，觀察效果會很不理想。同理，對于其他的熒光蛋白也是一樣的。

路陽儀器上海公司生產(chǎn)的激發(fā)光源有單波段，也有多波段。如果使用的488nm的單波段激發(fā)光源，則GFP和YFP不能共用激發(fā)光源；如果使用的是488nm和505nm雙波段激發(fā)光源，則可共用激發(fā)光源。路陽儀器自主研發(fā)多種應(yīng)該蛋白激發(fā)光源，可根據(jù)客戶要求定制激發(fā)光源。產(chǎn)品介紹請瀏覽：GFP激發(fā)光源。

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