GFP/RFP/BFP/YFP熒光蛋白用什么激發(fā)光源？

GFP綠色熒光蛋白的發(fā)現(xiàn)為生物工程研究帶來(lái)極大的便利，在GFP綠色熒光蛋白后，陸續(xù)又有了紅色熒光蛋白R(shí)FP，藍(lán)色熒光蛋白BFP，黃色熒光蛋白YFP……

綠色熒光蛋白（Green fluorescent protein，GFP）來(lái)自維多利亞水母，是熒光蛋白中應(yīng)用***多的一種。GFP可在508nm處自行發(fā)射綠色熒光，無(wú)需輔助因子和底物。將GFP基因插入質(zhì)粒作為一種手段，可以達(dá)到許多功能目的。

紅色熒光蛋白 (red fluorescent protein, RFP) 是一種熒光團(tuán)，在激發(fā)時(shí)會(huì)發(fā)出紅橙色熒光。人們利用定向誘變技術(shù)開(kāi)發(fā)了幾種變體。***初的變體是從Discosoma中分離出來(lái)的，名為DsRed。紅色熒光蛋白R(shí)FP約為25.9kDa。現(xiàn)在，紅色熒光蛋白還有其他變體，它們發(fā)出橙色、紅色和遠(yuǎn)紅色熒光。

黃色熒光蛋白（Yellow Fluorescent Protein ，YFP）可以看做綠色熒光蛋白的一種突變體，***初來(lái)源于維多利亞多管水母（ Aequorea victoria）。相對(duì)于綠色熒光蛋白，其熒光向紅色光譜偏移，而這主要是由于蛋白203位蘇氨酸變?yōu)槔野彼帷Ｆ涓蠹ぐl(fā)波長(zhǎng)為514 nm，更大發(fā)射波長(zhǎng)為527 nm。

在基因編輯研究中，我們常用激發(fā)光源激發(fā)熒光蛋白發(fā)出熒光做相應(yīng)的標(biāo)識(shí)或表達(dá)，那么這些常見(jiàn)的熒光蛋白激發(fā)光源是哪些呢？

選擇正確的激發(fā)光源，首先得知道熒光蛋白在什么樣的激發(fā)波長(zhǎng)下會(huì)發(fā)出熒光，即激發(fā)波長(zhǎng)。常見(jiàn)熒光蛋白激發(fā)波長(zhǎng)如下：

1）紅色熒光蛋白R(shí)FP：激發(fā)波長(zhǎng)532nm（綠光）,發(fā)射波長(zhǎng)588nm；

2）綠色熒光蛋白GFP：激發(fā)波長(zhǎng)為 488 nm（藍(lán)光或紫光）,發(fā)射波長(zhǎng)507 nm；

3）藍(lán)色熒光蛋白BFP: 激發(fā)波長(zhǎng)在400nm（紫）左右，發(fā)射波長(zhǎng)在450nm左右；

4）黃色熒光蛋白YFP: ***大激發(fā)波長(zhǎng)為514 （綠光）nm，***大發(fā)射波長(zhǎng)為527 nm。

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