中國科學院華南植物園農業(yè)生物技術研究中心在線發(fā)表《A simple and efficient in planta transformation method based on the active regeneration capacity of plants》，文獻中使用了LUYOR-3415RG便攜式雙波長熒光蛋白激發(fā)光源用于綠色熒光蛋白GFP的表達。

植物遺傳轉化技術是植物基因工程和現(xiàn)代農業(yè)分子育種的必要工具。然而，現(xiàn)有的植物遺傳轉化方案復雜且效率較低，制約了多數(shù)資源植物或農作物的遺傳改造，已成為植物資源開發(fā)和利用的技術障礙。因此，開發(fā)高效且多應用的植物遺傳轉化技術已成為植物或農業(yè)科研領域的重要研究方向。研究人員經過多年探索和研究，成功建立了一種以植物主動再生能力為基礎的新型植物遺傳轉化方法（Regenerative  Activity-dependent  in  Planta  Injection  Delivery，RAPID）。該研究利用強再生能力植物甘薯，進行多種遞送方式測試，發(fā)現(xiàn)通過甘薯莖段注射遞送方法能快速獲得陽性器官和轉化個體，同時在農桿菌菌種、侵染濃度、化學活性劑等方法條件上對轉化效率進行優(yōu)化提升，并完成了多種報告基因和遺傳編輯工具的應用，隨后通過遺傳學和細胞學分析方法確認了植物分生組織高效轉染以及新生轉化器官個體的快速再生，是迅速高效地獲得穩(wěn)定轉基因植株的根本原因。目前，RAPID方法已成功應用于甘薯、馬鈴薯、厚藤等無性繁殖的經濟作物或資源植物。

與傳統(tǒng)遺傳轉化方法相比，RAPID方法具有較高的轉化效率（提高20至100倍），操作流程更為簡便（縮短2至3倍），且無需昂貴且復雜的組織培養(yǎng)過程。RAPID方法克服了傳統(tǒng)方法在快速遺傳轉化方面的局限性，打破了各類資源植物開發(fā)和利用的瓶頸。基于植物主動再生能力及無性繁殖的特點，此方法有望應用于更廣泛的植物物種，實現(xiàn)更多特色資源植物和經濟作物的性狀改良與種質創(chuàng)新，以推動相關領域的基礎研究和應用研究發(fā)展，為特色植物的高效遺傳改良和現(xiàn)代農業(yè)育種應用提供理論和方法支撐。

文獻摘要：

Fluorescence detection

Fluorescence of the mScarlet reporter in live transgenic tissues was observed under a fluorescence stereo microscope (M205 FA, Leica, Germany) with a red fluorescence filter (Exc 540–580 nm, Em 593–667 nm). The spontaneous fluorescence spectra of sweet potato were observed under a confocal microscope (SP8 STED 3X, Leica, Germany). One-week-old adventitious roots were freshly selected for testing of root samples, and the third mature leaf of nascent shoots was selected for testing of leaf samples. Transgenic sweet potato materials containing the GFP reporter were observed using a dual-wavelength fluorescent protein excitation light source (Exc 440 nm, Em 500 nm, 3415RG, LUYOR, China). The regions near the phloem at the base of the stems were peeled to reduce epidermal autofluorescence, and the whole plant was irradiated with a light source under dark conditions. Green fluorescence was detected in the inner regions of the stems of positively transformed plants.

文獻鏈接：https://doi.org/10.1016/j.xplc.2024.100822 

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